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簡單介紹:
細胞周期實驗:上海達為科生物,主營實驗技術服務,如想了解細胞周期檢測的更多內容,歡迎來電咨詢,我們將熱情為你服務!
詳情介紹:
原理
碘化丙啶(Propidium,簡稱PI)是一種雙鏈DNA的熒光染料。碘化丙啶和雙鏈DNA結合后可以產生熒光,并且熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比。細胞內的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式細胞儀對細胞進行DNA含量測定,然后根據DNA含量的分布情況,可以進行細胞周期和細胞凋亡分析。
碘化丙啶染色后,假設G0/G1期細胞的熒光強度為1,那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強度的理論值為2,正在進行DNA復制的S期細胞的熒光強度為1-2之間。凋亡細胞由于細胞核發生濃縮以及發生DNA片段化(DNA
fragmentation)導致部分基因組DNA片斷在染色過程中丟失,因此凋亡細胞碘化丙啶染色后呈現明顯的弱染,即熒光強度小于1,在流式檢測的熒光圖上出現所謂的sub-G1峰,即凋亡細胞峰。
服務流程
- 細胞樣品的準備
- 碘化丙啶染色液的配制
- 染色
- 流式檢測和分析:用流式細胞儀在激發波長488nm波長處檢測紅色熒光,同時檢測光散射情況。采用適當分析軟件進行細胞DNA含量分析和光散射分析
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